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產(chǎn)品名稱:游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC0595

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),也可反映食物貯藏中的品質(zhì)變化。

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BC0595游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

 

產(chǎn)品名稱: 游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名:  Micro Free Aliphatic Acid Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào):BC0595          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣      產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:780
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:   游離脂肪酸檢測(cè)試劑盒|FFA檢測(cè)試劑盒| 游離脂肪酸|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹:
FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
    FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測(cè)定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容
    提取液:液體100 mL×1瓶,室溫保存。
    試劑一:自備。實(shí)驗(yàn)前,取一個(gè)玻璃瓶,按照正geng烷:無(wú)水甲醇:lv仿=24:1:25的比例配置(自備),蓋緊后混勻,室溫保存。
    試劑二:液體6 mL×1瓶,室溫保存。
    試劑三:粉劑×2瓶,4保存。臨用前在試劑瓶中加入13mL無(wú)水乙醇,充分溶解,4可保存一周。
    標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,10mg棕櫚酸,室溫保存。臨用前把試劑轉(zhuǎn)移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mLlv仿充分溶解,即為mol/mL的棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說(shuō)明
    FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
    FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿;利用銅試劑法測(cè)定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。
自備儀器和用品:
     研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、一個(gè)25 mL玻璃瓶、一個(gè)15mL玻璃瓶、正geng烷、無(wú)水甲醇、lv仿、無(wú)水乙醇和蒸餾水。

操作步驟:
一、樣品中FFA提取
1、血清中FFA測(cè)定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于4 離心機(jī)3500 rpm離心15min,取上層血清置于-20冰箱保存,待測(cè)。
2、組織中FFA含量測(cè)定:組織用生理鹽水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,稱取約0.1g,加入1.0 mL提取液,勻漿后,8000rpm,4離心10min,取上清液,待測(cè)。
二、測(cè)定:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到550 nm無(wú)水乙醇調(diào)零。
2. 試劑二在37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成1、0.8、0.6、0.40.2、0.1、0.05μmol/mL
4. 按下表在1.5mL離心管中加入相應(yīng)試劑

 對(duì)照管測(cè)定管空白管標(biāo)準(zhǔn)管
蒸餾水(μL10   
樣本(μL 10  
lv仿(μL  10 
標(biāo)準(zhǔn)品(μL   10
試劑一(μL100
試劑二(μL40
充分振蕩10min后,3000rpm,離心10min
上層溶液(μL50
試劑三(μL200
充分振蕩2min后,靜置15min,取0.2mL于微量比色皿/96孔板,在550 nm下測(cè)吸光值,分別記為A對(duì)照管、A測(cè)定管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。(對(duì)照管和空白管各只做一管)


三、FFA含量計(jì)算:
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,以ΔA標(biāo)準(zhǔn)(ΔA=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程y=kx+b。將ΔAΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管)帶入方程得到x
2.血清中FFA含量計(jì)算
FFAμmol/L=1000x

  1. 組織中FFA含量計(jì)算

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
FFA含量(μmol/mg prot=x÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
FFAμmol/g鮮重)=x×V樣總÷W
    V樣總:上清液總體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng)
1.試劑三配制應(yīng)盡量晚配,可在操作到加入試劑二時(shí),再配制試劑三。
2.必須保證每管的震蕩頻率及時(shí)間一致。
3.盡量在30min內(nèi)完成測(cè)量,并且測(cè)完后要密封好再丟棄。
4.因所用試劑多數(shù)為有機(jī)溶劑,同一支吸頭多次吸取會(huì)造成體積不準(zhǔn)確,建議更換吸頭。


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游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒

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